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ATCC菌株的筛选需要注意哪些因素

   ATCC菌株在生物制药中使用非常广泛,ATCC菌株培养条件简单,贴壁强度适中,比较容易转染,很适合用它来研究一般哺乳动物基因的功能。细胞培养过程中的污染不仅仅指微生物,而且还包括所有混入培养环境中的、对细胞生存有害或造成细胞不纯的物质,包括生物和化学物质。

ATCC菌株

  ATCC菌株的筛选我们要注意时间以及维持浓度:

  ATCC菌株筛选时不能太早;但是也不能太晚,因为转染了外源基因的细胞代谢负荷较大,增值较慢,时间长了就会被没有外源基因转入的细胞所淹没,终导致筛选不出阳性克隆,一般要在转染24小时之后才开始加筛选。随着细胞的代谢,浓度和活性都会下降,所以每3-5天都要更换一次筛选液。关于维持浓度,有人说ATCC菌株会出现对抗生素的抗性,应不断提高其浓度。而且如果要挑选几个阳性克隆中较高表达的克隆的话,可以调整抗生素的浓度。当然,抗性基因高表达,目的基因不一定就跟着高表达。

  


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